观察Golgi-stained鼠大脑神经组织
高尔基染色法
高尔基染色法是一种银染色技术,可视化树突棘的染色好大脑神经细胞的轴突和树突黑色,一直被用来观察神经细胞的结构和变化在大鼠和小鼠大脑标本。
染色使用高尔基染色法是由高尔基在1873年发现,意大利诺贝尔生理学或医学奖得主为他工作的金属浸渍实验神经组织(银染色)。这种方法用于被称为黑色的反应,因为当一个大脑标本与固定剂固定解决方案包含四氧化锇和重铬酸钾在硝酸银溶液染色,神经细胞的精细组织变黑。Golgi-Cox染色,发现荷兰医生,考克斯在1891年,使用改进的化合物。大脑部分固定与重铬酸钾的混合物,铬酸钾,和氯化汞溶液当沉浸在一个氨溶液变成黑色,它提供了更稳定的结果。
高尔基染色法和Golgi-Cox染色根据各自的协议。实现更高的工作效率,包括染色时间短,和更高的稳定性为标本的创建、各种试剂中已经作了一些改进。因此,组织染色方法还用于观察正常神经组织染色的大脑部分。这些方法染色大脑中特定的神经组织部分,这使得它们对于研究各种主题,如确定形状和改变海马树突的影响认知和记忆形成。
高分辨率观测Golgi-stained大脑的部分
大脑达到高级功能,比如内存,使用网络形成一个从每个神经细胞轴突延长和大量其他通过突触神经细胞彼此连接。期间观察大脑的实验和研究,创建几个标本从动物的大脑。大脑是切成小块相同的厚度在低温下使用低温恒温器和根据高尔基染色法染色协议。
大鼠和小鼠的大脑作为标本非常小,因此有极细的神经细胞轴突和树突,这需要使用显微镜观察到高的放大。然而,很难完全关注整个细神经细胞在大脑部分,因为部分有一定的厚度。即使很小的倾斜或高度差标本大大影响聚焦。一个具有挑战性的问题是获取图像足够清晰用于论文演讲和会议,以及高放大观察和评估。在高放大观察时,重要的是神经细胞获得清晰的图像。同时,同样重要的是总是理解大脑的哪一部分被观察到的部分。放大倍数增加达到必要的决议,视野变得狭窄。了解整个大脑的部分,有必要观察大量的领域的观点。进行高分辨率成像面积大,多个图像必须被捕获在高倍率和缝合。然而,它是繁琐和困难来记录和管理大量的高放大图像和手动针,这需要大量的时间和精力。
解决方案:高分辨率观察大脑的部分
运营商需要一个高水平的技能操作显微镜的观察和创建标本染色的大脑部分。甚至专家需要专注和消耗大量的能量。
日本基恩士完全电动驱动系统包括重点和阶段运动,简化各种繁琐的和先进的流程需要在显微镜下观察,所以他们只能使用一只老鼠。日本基恩士已经开发了一体化的荧光显微镜BZ-X800,既能获取清晰的图像高倍镜下和记录大量的数据,允许用户快速分析整个标本。
无缝的高分辨率观测整个图像和高放大图像
以下的观察图像Golgi-stained老鼠大脑部分使用BZ-X800捕获。
如果一个标本是倾斜的,厚,或高度差异,传统的系统只能将部分标本带入焦点,使得它难以理解神经细胞在3 d。BZ-X800使用Z-stack自动捕获多个图像在z轴方向上的全部函数只组成部分每个图像的焦点,可以方便地获取完全聚焦图像。这使得它可以观察神经细胞和Golgi-stained黑色部分明显。
此外,BZ-X800配备了图像缝合捕获多个高分辨率图像高倍镜而自动移动机动阶段X轴和y轴方向。这使得它可以捕捉高分辨率完全聚焦图像太大的整个大脑部分属于一个高倍镜下观察时的视野。
完整的焦点函数和图像拼接可以一起使用,它允许用户观察细神经细胞高倍镜而总是理解大脑的哪一部分被观察到的部分。
执行Z-stack捕获多个图像在一个视野不同Z-planes,然后创建一个全心全意的图像进行图像处理,即使在厚的标本。然后重复这个过程在整个标本,以及由此产生的图像是缝合跨大区域创建一个全心全意的形象。
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Z-stack
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给予高度的关注
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图像拼接
物镜:CFI计划Apoλ10 x
图片缝合:16图像x 13图像
准确的计算和测量使用相同的形象
清晰的图像被BZ-X800不仅允许观察,但也使用相同的图像快速定量测定和分析。
混合细胞计数函数指定一个完整的部分作为一个面具区域并提取并量化某些细胞在这一领域基于颜色和亮度的差异。用这个函数,整个大脑中的神经细胞部分的比例可以自动计算和数据可以输出电子表格格式。这个函数也有相衬模式,提取并计数培养细胞在后台不受亮度不均匀,甚至允许精确定量分析体外培养的神经细胞。
此外,测量时间可以显著减少了使用宏观细胞计数处理一批图像基于条件提取混合细胞计数。传统手工定量分析需要大量的时间和精力和礼物的风险测量条件操作员地可能会有所不同。使用混合细胞计数快速提供高度可靠的数据没有错误造成的不同条件。
通用的一个单元
BZ-X800配备高灵敏度,高分辨率CCD单色相机和暗室冷却,使先进的荧光,brightfield,相衬的观察和分析。BZ-X800支持多井板块以及Golgi-stained大脑部分用一个单位,所以它可以执行两个清晰的观察各种标本和准确测量和评价,没有错误。因为只有一个单位需要各种标本的观察和分析,BZ-X800帮助节省空间,减少设备总足迹。
使用一体化荧光显微镜BZ-X800
- 当标本太大与单一视场成像,图像缝合可以执行捕获多个高放大图像样本。然后图像无缝地连接在一起,创建一个全心全意的,高分辨率的图像完整的标本。
- Z-stack函数捕获多个图像在不同震源位置和完整的焦点函数创建一个完全聚焦图像通过结合只有从每个区域图像是人们瞩目的焦点。
- 混合细胞计数可以准确地提取和计算目标细胞。比例可以作为电子表格中的数据计算和输出格式。
- 条件的基础上,提取和混合细胞计数,宏观细胞计数可用于快速处理一批图像。
- 荧光性、brightfield和相衬各种标本的观察和分析一个单元,BZ-X800帮助节省空间,减少设备总足迹。
